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杀菌消毒
杀菌消毒

(一)消毒灭菌方法
(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。 


干热灭菌法
120 oC~150 oC的高热,并保持90~120分钟,杀死细菌和芽孢,达主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。用此方法灭菌的物品干燥,易于酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培养工作


湿热灭菌法
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在1.0~1.1 kg/cm2,维持20~30 min即可达到灭菌效果。 


射线灭菌法
紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。


适合于实验室
30 min。用紫外线杀菌时应注意,不能边照射边因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害,而且对培养物及一些试剂等也会产生不
过滤除菌法
使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留,从而达常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌,或用玻璃细菌滤器、滤球0.22~0.45 μm范围内或用更小的细菌滤膜,溶液通过滤膜
细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻,并利用滤膜的吸附作用,阻制小于滤膜孔径的细


化学消毒剂消毒法
空气、工作面、操作者皮肤、某些实验器皿等。
70%~75%乙醇、过氧乙酸、来苏尔水、0.1%新70%~75%乙醇、0.1%~0.2%氯化汞、10%饱和漂白粉等进行实验材料的灭菌;利用甲醛加高锰酸钾[(2mL甲醛+1g高锰酸)/m3]或乙二醇(6mL/m3)等加热熏蒸法进行无菌室和培养室的消毒。在使用时应注意安全,须选用合适的药剂种类、浓度和处理时间,才能达
抗生素抑菌法
是培养过程中预防微生物污染的重要手段以及作为微生物污染不严重时的急救”措施。常用的抗生素有青霉素、链霉素和新霉素等。


二)不同种类物品及培养物的消毒灭菌方法
无菌操作室灭菌
观察或更换培养液时,必须从各方面防止任何污染物进入培养液或容器,由于无菌操作室的污染来源主要是空气中的细菌和真+甲醛[(2ml甲+1g高锰酸钾)/m3]进行无菌室的灭菌。经常使用的无菌操作室,在每次使用前都应进行30min,进行空气灭菌。对超净工作台,每次操作前用30 min,然后用70%~75%酒精擦拭。
培养液灭菌
24小时内完成灭菌工序。目或对培养液中耐热组分先进行高压将分装好的培养液放入底部有一定量(淹没加热管)凉水的高0.35~0.4kg/cm2时排净灭菌器内冷空气,以便使蒸汽能到达各个
1.0~1.1 kg/cm2为C,保持15~20 min即可。由于消毒灭菌效果取决于温度而不是压力,所以在一定压121 oC的蒸汽温度下可以很快杀死各种细菌及
1.0~1.1kg/cm2、C。消毒灭菌时间与需要消毒灭菌的培养液量密切相关(表2-3),时间不足达不到灭菌时间过长培养液内的一些化学物质遭到破坏,影响培养液成分。消毒灭菌结束后,关
排除剩余蒸汽,取出培养液。不可引起减压沸腾,使容器中液体溢出。培养液组成中如含有遇热易则需用过滤方法消毒灭菌。首先对培养液中耐热组分进行高压蒸汽灭菌后放置40oC左右琼脂即将凝结前,加入经过过滤除菌的不耐热溶液,液体培养液在冷却到室温后再加入过滤除菌溶液。过滤除菌时,使用孔径0.22~0.45μm或更小的细菌滤膜。过滤除菌可利用抽滤装置或注射过滤器进行,所用器
121 oC。
玻璃器皿、塑料器皿和器械灭菌
但在蒸汽灭菌后最好及时烘干水分。对不能进行75%酒精浸泡,使用前在无菌操作台面上晾干的同时,用紫实验室还可以用环氧乙烷灭菌袋对塑料器皿进行消毒,消毒后的器皿要充分2~4小时后才可使用。无菌操作所用的各种器械,一般采用干热或高压蒸汽灭菌,或75%酒精浸泡,然后在无菌操作台面上晾干的同时再用紫外线重复杀菌;在使用期间可培养材料的消毒灭菌携带着微生物及杂质,接种前须进行表面消毒灭菌,对内部已受10~12%,浸泡5~15 min)、过氧乙酸(0.05%,30 s~1min)、酒精(70~75%,浸泡2 min)。


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脚注信息
 

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